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Artículos científicos

Inmunopurificación de proteínas de poliposis coli adenomatosa (APC)

información clave

fuente: Notas de investigación de BMC

año: 2013

autores: Kerryn L. Elliott, Bruno Catimel, Nicole L. Church, Janine L. Coates, Meredith J. Layton, Maree C. Faux, Antony W. Burgess

resumen / resumen:

ANTECEDENTES: El gen supresor de tumores de la poliposis coli adenomatosa (APC) codifica una proteína de 2843 residuos (310 kDa). APC es una proteína multifuncional involucrada en la regulación de la señalización de β-catenina / Wnt, dinámica citoesquelética y adhesión celular. Las mutaciones APC ocurren en la mayoría de los cánceres colorrectales y típicamente dan como resultado el truncamiento de la mitad C-terminal de la proteína.

RESULTADOS: Para investigar las propiedades biofísicas de APC, hemos generado un conjunto de anticuerpos monoclonales que permiten la purificación de formas recombinantes de APC. Aquí describimos la caracterización de estos anticuerpos monoclonales anti-APC (APC-NT) que reconocen específicamente APC endógenas tanto en solución como en células fijadas. Se produjeron APC (1-2843) de longitud completa y proteínas APC truncadas asociadas al cáncer, APC (1-1638) y APC (1-1311) en células de insecto Sf9.

CONCLUSIONES: Las proteínas APC recombinantes se purificaron utilizando un enfoque de afinidad de dos pasos utilizando nuestros anticuerpos APC-NT. La purificación de las proteínas APC proporciona la base para análisis detallados de la estructura / función de las formas endógenas, truncadas por el cáncer y de longitud completa de la proteína.

organización: Instituto Ludwig para la Investigación del Cáncer

DOI: 10.1186/1756-0500-6-429

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